产品货号：
JN3011
中文名称：
Tth酶
英文名称：
Tth DNA Polymerase
产品规格：
250U|250U×5
发货周期：
1～3天
产品价格：
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Tth DNA聚合酶是一种来源于嗜热菌Thermus thermophilus HB8的热稳定的DNA聚合酶，该酶在Mg2+参与下，可以催化5’至3’方向的依赖于DNA模板的脱氧核苷酸的聚合，可广泛应用于各种PCR反应，与Taq酶相比对血源性抑制物等抑制成分更加耐受。在Mn2+存在下，表现更强反转录活性，可以用来进行单管一步法RT-PCR反应。
- 同时具有反转录酶活性与聚合酶活性，能够用于一步法检测。
- 具有更高的反转录温度60～70℃，反转录的特异性高。
- 对PCR抑制物具有更高的耐受性。
- Tth的反转录温度在60℃～70℃，反转录时间可以为15～30min；
- 该体系更适合于特异性引物进行RT反应，并且引物Tm值应为60℃或更高温度。
- 反应体系中含有Mn2+，因此，本体系保真度有所降低，不适合于保真度要求较高的克隆、测序等实验。
- 使用时请上下颠倒轻轻混合，避免起泡，并经轻微离心后使用。
- 反应液的配制、分装请使用新的（无污染的）枪头、Microtube等，尽量避免污染。
| 组分 | 250U | 250U×5 |
| 10×PCR buffer | 500μL | |
| 5×RT-PCR buffer（Mn2+Free） | 1mL | |
| Tth DNA Polymerase（5U/μL） | 50μL | |
| MnCl2（25mM） | 300μL |
保存条件：-20℃储存。
一、用于PCR
- 常用PCR反应体系（20μL）：
成分 用量 10×PCR buffer 2μL Tth DNA Polymerase 1μL dNTPs 0.5μL 上游引物 0.2～1μM（终浓度） 下游引物 0.2～1μM（终浓度） 模板 5～500ng RNase-Free Water 至20μL - 推荐PCR反应程序：
温度 时间 循环数 95℃ 3min 1 94℃ 30sec 35～40 55℃ 30sec 72℃ 45sec 72℃ 10min 1
二、用于RT-PCR
- 常用RT-PCR反应体系（20μL）：
成分 用量 5×RT-PCR buffer 4μL Tth DNA Polymerase 1μL MnCl2 1μL dNTPs 0.5μL 上游引物 0.2～1μM（终浓度） 下游引物 0.2～1μM（终浓度） 模板 5～500ng RNase-Free Water 至20μL - 推荐RT-PCR反应程序：
温度 时间 循环数 60℃ 30min 1 95℃ 3min 1 95℃ 20sec 35～40 60℃ 1min
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